진공혈청분리관(SST)을 사용하는 경우

진공혈청분리관(SST)을 사용하여 주십시요.

• 진공채혈기로 채혈하는 경우, tube의 뚜껑을 열 필요 없이 주사침을 꽂으시면 필요한 양만큼 혈액이 흡입됩니다.
• 혈액 채취량은 각 검사 항목에 필요한 혈청량의 2.5배 이상 취하십시요.
• 혈액을 채혈한 후 수직으로 세워서 30분이 경과한 후에 원심분리하십시요.
• 분리된 혈청은 다른 용기에 옮길 필요 없이 그대로 보관하십시요.
• 일반 주사기로 채혈 시 주의사항: 주사기로 채혈하여 SST에 넣을 때는 진공채혈 뚜껑을 손으로 연 다음, 주사바늘을 빼고 주사기 입구를 tube의 기벽에 대고 살며시 넣어 주십시요. 빠른 속도로 주입하는 경우에는 용혈(Hemolysis)이 발생할 수 있습니다.

※ 주의: 치료 약물 모니터링 혹은 독성학적 분석을 위한 검체는 결과가 낮게 측정될 가능성이 있으므로 Plain tube를 사용 하시고 혈당 단독검사일 경우 NaF tube를 사용하시기 바랍니다.

혈청분리관(Separator)을 사용하는 경우

혈청분리관 (Seperator)에 혈청을 분리하여 보낼 때에는, 혈청분리관 입구를 새지 않도록 완전히 밀봉한 후 보내 주십시요.

일반혈액(CBC)검사

• Potassium EDTA vaccutainer tube에 정확히 혈액 3mL를 넣어주십시요.
• 검사는 2시간 이내에 이루어져야 하며 실온에서 6시간 이상 방치시 MCV, ESR, PLT, WBC count, Reticulocyte (2일내 소실) 등의 영향을 받습니다.
• 즉시 검사가 어려울 경우에는 4℃에서 보관하며 24시간까지는 CBC 결과가 안정합니다. 절대 얼려서는 안됩니다.

※ 주의 : 세포면역검사인 경우에는 실온 보관 하십시요.

혈액도말관찰을 목적으로 하는 검사

신선한 검체를 사용하여 얇고 고르게 도말해야 정확한 감별이 가능합니다. 채혈 후 천천히 혼합한 후 반드시 냉장보관하여 주십시오. 수거 전 이미 24시간 경과한 검체는 검사결과가 부정확 할 수 있습니다.

• 정확한 임상 진단을 위해서는 일반 혈액 검사 결과가 필요하므로, 반드시 소견을 제공하여 주십시오.
• 말초혈액 (Peripheral Blood Smear, PBS) 의뢰시 Lancet 천자가 유용합니다.
• 골수 (Bone Marrow)는 formalin 등에 오염되거나 희석이 심할 경우에는 검사가 불가능하며, 고정이 완전치 않거나 고정액이 제거되지 않은 검체는 검사에 영향을 미칩니다.
• 특수염색이 필요한 경우에는 사전에 연락을 드리겠습니다.

일상적인 검사를 위한 단회뇨(정성검사/Random Urine)

채취시간

• 아침 첫 소변(특히 임신반응검사)이 농축되어 있으므로 일반적인 검사에 가장 적합합니다.
• 반드시 식후 2시간 이상 경과하고 심한 운동을 하지 않은 때에 채취하십시요.

보관

• 의뢰하기 전까지 반드시 냉장고에 보관하십시오.

※ 주의 : 24시간뇨를 받을 때는 알코올이나 기타 영양을 미칠 수 있는 음식 또는 약물 복용을 금합니다.
모든 정량적인 검사는 24시간 뇨를 채취하여 그 양을 정확히 측정하고, 잘 혼합한 후 적당량을 취하여 보냅니다. (총뇨량 기록)
검사 종목에 따라 보관방법, 보존제 첨가 등을 결정하십시오.

채취방법

• 채뇨를 시작할 때는 일단 방광을 완전히 비우도록 배뇨시키고, 이때 소변은 버리십시오.
• 이후부터 24시간 내의 모든 요는 전부 받으십시오. (예: 오전 6시부터 그 다음날 오전 6시까지의 소변을 모으고자 할 경우는, 첫날의 6시 소변은 버리고 다음 소변부터 다음날 6시까지 전부 모읍니다.)

뇌척수액

일반적으로 3개의 용기에 각각 2-4mL씩 차례대로 무균적으로 받아서, 각각 화학 / 혈청검사, 세균검사, 세포수 산정에 이용합니다.

기타체액

• 흉수, 복수, 심낭액 등을 이용하여 세포수 산정, 화학검사, 세균검사를 할 때는 Sodium citrate나 Heparin등의 항응고제를 사용하십시오.
• 단, clot 형성을 관찰할 때는 항응고제를 첨가하지 않습니다.

단회 대변

2 ~ 3g을 대변 용기에 채취하여 보내십시요.

검체 취급의 공통적 주의사항

• 검체는 무균적으로 채취되어야 합니다.
• 의뢰 이유와 가족력은 의뢰지에 반드시 기록되어야 합니다.
• 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 지연될 경우에는 검사과정이 지연되거나 간혹 검사에 실패할 수도 있습니다.
• 검체 보관 및 운송은 실온 상태로 합니다.
• 태아를 대상으로 하는 염색체 검사는 필요하다면 검체 채취 전에 이 검사의 정확성 및 검사 한계에 대해 환자나 보호자에게 충분히 설명을 하여 동의를 얻은 후에 검사를 시행하는 것이 바람직합니다.

말초혈액(Peripheral blood;P.B)

• 혈액 5mL (소아 3mL)를 무균적으로 채취해야 하며 Sodium heparin 용기에 넣어 응고되지 않도록 서서히 아래 위로 혼합합니다. 응고된 검체는 검사가 불가능합니다.
• Sodium heparin 이외의 항응고제는 세포 분열능 저하로 인하여 배양에 실패할 확률이 높습니다.
• 환자의 임상소견 및 추정 진단에 따라 검사 방법 자체가 달라지므로 반드시 의뢰서를 기록합니다.
• 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 경과되면 검사에 실패할 확률이 높습니다. 검체 보관 및 운송은 실온 상태로 합니다.
• Fragile-X Syndrome 유무를 결정하고자 할 때는 검출률이 높은 Fragile-X DNA Study 방법이 바람직합니다.

태아조직(Products of conception;POC)

• 태아 조직의 경우 오염될 확률이 매우 높습니다. 무균적으로 채취한 조직을 DML이 제공하는 전용운송배지에 넣어 의뢰합니다.
• 자궁 내에서 사망한지 24시간 이상이 경과한 검체는 배양에 실패할 확률이 높습니다.

양수(Amniotic fluid:A.F)

• 검체에 모체 세포가 혼입되는 것을 방지하기 위해 채취 시 처음의 미소량 (약 2mL 정도)은 반드시 버린 다음에 약 20~30mL 정도의 양수를 채취합니다.
• 양수 20~30mL 채취하여 본원이 제공하는 50mL Conical Tube로 옮겨 의뢰합니다.
• 양수 내 태아 유래 세포가 적은 경우 (원심 후 침전물이 육안으로 확인이 안됨)나 육안적으로 검체의 색깔이 빨갛거나(혈액이 혼입되었음을 의미) 짙은 갈색인 경우는 배양에 실패할 수도 있습니다.

융모막(Chorionic villi sampling:C.V.S)

• 융모막 20~40 mg 을 채취하여 본원이 제공하는 융모막 전용 운송용 배지에 넣어 의뢰합니다.
• Zoom-stereo microscope으로 관찰하여 순수한 융모막이 적을 경우에는 직접법, In Situ와 플라스크 방법을 병행할수 없고, 단지 플라스크 방법만을 시행함으로써 모체 세포의 오염 가능성이 높아지고 결과가 지연되거나 혹은 배양에 실패할 수도 있습니다.

제대혈(Cord blood)

제대혈은 응고가 잘 되므로 채취 후 즉시 Sodium heparin 용기에 넣어 여러 번 잘 혼합합니다.

혈액종양질환의 진단, 예후 추정을 위한 염색체 검사

만성백혈병, 급성백혈병, 골수증식성 질환, 골수이형성증후군, 기타 혈액질환의 진단 및 예후 추정에 필요한 검사입니다.

골수 (Bone Marrow)

• 골수 천자액 3mL 를 채취하여 본원에서 제공하는 Sodium heparin 용기에 넣어 의뢰합니다.
• 환자의 임상 소견 및 추정 진단에 따라 검사 방법 자체가 달라지므로 반드시 의뢰서를 기록합니다.
• 혈액 종양에서는 세포 배양 시 혈액 검사 결과를 고려해서 적절한 세포수가 되도록 배양해야 하므로 귀원에서 시행한 일반혈액검사 (CBC 결과)를 반드시 기록해 주십시오.
• 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 지연될 경우에는 검사과정이 지연되거나 검사에 실패할 수도 있습니다.
• 응고된 검체는 검사가 불가능합니다.

말초혈액 (Peripheral Blood)

• 선천적 염색체 이상의 진단
• 다발성 선천성 기형의 진단이 필요한 경우(다운 증후군, 에드워드 증후군 등)
• 발육 부전 / 정신 지체 / 비정상 핵형이 의심되는 경우
• 2차적 성징이 지연되거나 나타나지 않는 경우
• 불임 부부 / 3회 이상의 반복 유산 / 사산의 기왕력을 가진 부부
• 염색체 이상 보인자의 확인이 필요한 경우
• 산전 태아의 염색체 이상 진단
• 산모의 나이가 35세 이상인 경우
• 모체 혈청을 이용한 Triple test에서 염색체 증후군이 의심되는 경우
• 태아의 초음파 검사에서 비정상 소견을 보인 경우
• 부모가 Reciprocal Balanced Translocation 인 경우 (염색체 이상의 보인자인 경우)
• 염색체 이상의 자녀를 출생한 기왕력이 있는 경우
• 융모막을 이용한 염색체 검사상 Mosaicism을 보인 경우에는 양수/제대혈을 이용하여 확인 검사를 시행하는 것이 바람직함.

• 분자진단 검사에서 가장 중요한 것은 적절한 검체와 오염의 방지입니다.
• 혈액을 이용하여 PCR검사를 의뢰하고자 할 경우의 원칙적으로 모든 검체는 EDTA Blood를 사용합니다.
• Hepatitis Virus 관련 검사는 항응고제가 없는 SST tube의 사용을 원칙으로 합니다.
• Papilloma Virus 관련 검사는 각 종목에 해당되는 전용용기를 반드시 사용해야 검사가 가능합니다.
• 조직으로 의뢰하는 검사의 경우 포르말린 고정을 금합니다.
• 안내서에 수록된 각 검사항목의 검체 종류를 확인하시고 적절한 용기를 사용하여 주십시오.

• 임신부의 정보가 필요하므로 반드시 전용 의뢰지를 첨부하여야 합니다.
• 의뢰지에는 아래의 사항을 빠짐없이 기록하여야 합니다.
• 실제 생년월일
• 체중
• 최종월경일 LMP
• 임신 주수 (초음파 (BPD), LMP), NT (Nuchal Translucency) 등
• 과거력 (Down, NTD 출산아 경험, 인슐린의존성당뇨(IDDM) 등)
• 재검 의뢰시 1차 결과, 기타 소견 등

검사 시기

• 임신 10 ~ 13 주
• 1st Trimester : Double test (PAPP - A, Free beta - hCG)
• 임신 14 ~ 22 주
• 2nd Trimester : Double test (AFP, hCG)
• Triple test (AFP, uE3, hCG)
• Quad test (AFP, uE3, hCG, Inhibin A)

신생아 선천성 대사이상검사(Newborn screen)을 위한 검체 채취시기

채취시기건강한 신생아의 경우 가장 이상적인 채혈 시기는 48-72시간 사이로, 일반적으로 퇴원 전 채혈하는 것이 좋습니다.
특정 아미노산의 혈중 증가율은 질환의 심각성이나 단백질 섭취량에 따라 달라지므로 너무 일찍 검사를 실시하는 경우 위음성을, 반대로 정상 신생아에서 출생 직후 TSH surge가 있으므로 48시간 이전에 채취한 검체에서는 갑상선 저하증에 대한 위양성의 결과를 초래할 수 있습니다.
입원 기간이 연장되는 미숙아 등에서는 생후 7일 정도에 검체를 채취하는 것이 좋으며, 입원일이 14일을 초과하는 경우는 퇴원 시, 1개월 이상일 경우는 1개월 째 재검을 실시함이 바람직합니다.
수혈이 필요한 경우는 가능하면 수혈 받기전에 추기 검체를 채취하도록 하며, 수혈 전 채취한 검체가 생후 24시간 이내에 채취 되었을 경우 생후 30일 및 60일에 재검을 실시하는 것이 좋습니다. 또한 채혈 card에 수혈 후 검체를 채취하였다는 내용과 함께 가장 최근 수혈한 날짜를 반드시 기입하여 주십시오.

검체 채취요령

다음은 신생아 선천성 대사이상 검사를 위한 검체 채취 방법으로, 신생아 발 뒷꿈치의 모세 혈관에서 fillter paper (혈액여지)를 이용하여 검체를 채취하는 요령입니다.

• 장갑을 착용합니다.
• 발에 혈류를 증가시키기 위해 환아의 다리를 심장보다 아래쪽에 위치하도록 합니다.
• 발뒤꿈치를 따뜻하게 합니다. (3분 정도 따뜻한 물수건으로 뒤꿈치를 감쌈으로써 혈류를 증가시킬 수 있습니다.)
• 오염을 방지하기 위하여 검체를 채취하는 동안 filter paper에 그려진 원을 손으로 만져서는 안됩니다. 또한 filter paper가 물이나 알코올, 방부제, 로션, 파우더 등에 닿지 않도록 주의해야 합니다.
• 채혈 부위를 70% 에탄올로 닦습니다. 남아있는 알코올을 마른 dry sterile gauze로 닦아낸 후 마르도록 기다립니다.
• 채혈은 아래 그림에 회색으로 표시한 부위에서 실시합니다.
• 신생아의 발 뒷꿈치 바닥에 소독한 일회용 lancet(2.4mm point 이하)을 이용하여 재빨리 깨끗한 puncture를 합니다.
• 소독된 gauze pad로 처음 나온 혈액 한 방울을 닦아낸 후 커다란 방울이 되도록 합니다.
• Filter paper를 커다란 혈액 방울에 대어서 충분한 양의 혈액이 한번에 filter paper에 그려진 원을 채워 흡수되도록 합니다.
• Paper를 채혈부위에 대고 눌러서는 안되며, 채혈부위를 쥐어짜서도 안됩니다.
• 혈액을 filter paper의 한쪽 면에만 묻히도록 합니다.
• 계속해서 나오는 혈액 방울을 통일한 원안에 다시 묻혀서는 안되며 혈류가 감소하여 원이 완전히 채워지지 않았으면 새로운 원에 채혈을 다시합니다.
• 이러한 과정을 반복하여 filter paper에 있는 네 개의 원을 완전히 채우십시오.
• capilary tubes를 사용치 마십시오.
• 채혈 후 발을 몸보다 위에 위치하도록 하고, 피가 멈출때까지 채혈 부위를 소독한 거즈나 솜으로 꼭 눌러 주십시오.

조직, 세포 병리 검사는 인체의 적출된 조직 및 세포를 이용하여 병의 원인을 확인하기 위한 목적입니다.

조직 검체의 고정 및 운송 방법

• 수술조직을 새지 않는 용기에 옮긴 후 고정액으로 10% 중성 포르말린 (formalin)을 넣어 조직이 완전히 담기게 하십시오.
• 포르말린 고정액은 조직의 약 10배 정도의 양으로 넣으십시오.
• 포르말린을 사용하는 목적은 적출한 조직의 자가융해 및 건조를 방지하기 위한 것이며, 검체 보존성이 뛰어납니다.
• 만약 부위가 다른 곳에서 적출한 조직이라면 각각 다른 용기에 넣고 고정하십시오.
• Punch biopsy 등 작은 생검 조직은 거즈나 여과지에 붙여 유실되지 않도록 처치한 후 고정하십시오.
• 각 적출물에 따른 고정 방법은 다음과 같습니다.
• 자궁 (Uterus) 등 큰 장기 : 용기의 절단면을 아래로 하여 넣고, 고정액을 충분히 넣어 잠 기도록 하십시오.
• 소화관 (Stomach) 등 점막 장기 : 점막 부위를 밖으로 뒤집어 얇은 거즈로 잘 싸서 고정하 십시오.
• 폐 (Lung) : 기관지 말단으로부터 고정액을 주입하여, 가능한 폐포를 부풀려 공기를 빼고 조직 사이까지 골고루 고정액이 들어가도록 하십시오.
• 생검조직 (Punch biopsy) : 천자한 조직의 수분을 제거하고 거즈나 여과지에 10초 정도 올려 놓은 후, 그대로 포르말린에 고정하십시오. 조직이 작으므로 건조되지 않도록 주의하십시오.

세포 병리검사

세포 검사용 검체는 세포 변성을 방지하여 정확한 세포 관찰을 할 수 있도록 95% ethyl alcohol 또는 cytospray등 피복고정제 (coating fixation)로 반드시 고정하십시오.
95% 에탄올 (Ethyl alcohol)로 고정하는 경우 적어도 30분 이상 고정해야 합니다.
피복고정제 (coating fixation)는 도말된 슬라이드로부터 25-30 cm 거리를 둔 위치에서 분무합니다.

각 검체 종류에 따른 관리 방법은 다음과 같습니다.

부인과 재료 <자궁 질부, 경부, 내막 등>

• 검체는 한번에 많이 채취한 후 slide에 얇고 균일하게 도말하고, 세포 고정제를 분무하여 고정하십시오.
• Cytobrush를 사용하여 채취하십시오.
• 검체 채취 하루전에 질내 치료나 피임약제 등의 사용을 금해 주십시오.
• 검체 채취전 외상 치료나 biopsy 등을 행하지 마십시오. 혈액의 RBC가 슬라이드에 도말되어 판독이 어려워집니다.
• 액상세포용기를 사용하는 경우 Cytobrush로 채취한 모든 세포를 액상용기안의 액체에 풀어 넣은 다음 새지 않게 뚜껑을 잘 막아 보내십시오.

객담 (Sputum)

• 아침 첫 객담을 받아 두 장의 slide 사이에 넣고, 전후 좌우로 비벼 펼친 다음, 즉시 95% ethyl alcohol에 고정하십시오.
• 채취 시 타액이 섞이지 않도록 주의하고, 객담 자체를 의뢰할 경우 12-24 시간 이내에 보내주십시오.

흉수액 (Pleural fluid), 복수액 (Ascitic fluid) 등 액체

• 가능한 전량을 혼합하여 원심한 후 egg albumin을 침사에 첨가하여 slide에 도말하고, 즉시 95% ethylalcohol로 고정하십시오.
• 도말이 불가능할 때 검체를 전부 냉장 보관하여 12-24시간 이내에 보내십시오.

Urine, CSF 등 protein 양이 적은 검체

• 원심분리기에서 1500 rpm으로 10분간 원심하여 침전물을 slide에 도말한 후 고정하여 보내십시오.
• 원심이 불가능 할 경우 검체에 50% ethyl alcohol을 검체의 양과 같은 양으로 혼합한 후 그대로 보내십시오.

천자액 (Aspiration biopsy)- 유선, 갑상선, 림프액 등

• 2-4장의 Slide에 도말 후 일부는 즉시 고정하고, 일부는 slide 자연건조 후 고정하십시오.
• 검체량이 적은 경우 주사바늘과 주사통을 생리식염수로 세정하고 원심하여 침전물을 도말한 후 고정하십시오.

pH가 낮은 검체-위액, 담즙 등

• 검체는 얼음을 채운 후 box에 보관하고, 가능하면 수 분 이내에 원심하여 도말 slide를 만들어 고정하십시오.
• 고정이 불가능할 경우 70% ethyl alcohol을 검체의 1/3~1/4 정도의 양이 되도록 넣은 후, 얼음 box에 넣어 즉시 보내십시오.

검사결과에 오차를 초래하는 요인

응고(Clot)

항응고제와 혈액이 충분히 혼합되지 않을 경우 혈액학적 검사시 부분응고(Partial clot)로 인한 부정확한 결과를 초래합니다. 따라서, 항응고제가 든 용기에 채혈할 경우 충분히 잘 혼합하여(1~2분정도) 가능한 빠른 시간내에 의뢰해 주십시오.

용혈(Hemolysis)

용혈로 인하여 Hemoglobin과 다른 세포내 물질이 반응에 영향을 미치며 결과치의 상승 등을 초래합니다. 따라서, 채혈과 시험관 분주시에 주의하여야 합니다. 주사기로 채혈을 할 경우 피스톤은 너무 세게 잡아 당기지 마시고, 튜브에 담을때 튜브의 마개를 열어 주사바늘을 빼고 천천히 tube벽면에 흘려 넣습니다. 또한, 채혈 후 30분 정도 경과 후 원심분리하여 주십시오.

용혈된 검체에 의한 결과에 영향을 주는 검사항목

증가

Total protein, K, Iron, Inorganic P, Amylase, AST, ALT, LDH 등감소Bilirubin, Lipase, ACP 등

감소

Bilirubin, Lipase, ACP 등

고지혈 혼탁(Lipemic) : 식사 후에 채혈 할 경우 검체의 혼탁이 올 수 있습니다. 이러한 검체의 혼탁은 지질 검사의 결과에 영향을 주어 부정확결과(비특이적 수치 상승)를 초래합니다. 따라서, 검체항목에 따라 혈액채취를 12시간 공복유지 후에 합니다.

식후 채혈시 결과에 영향을 주는 검사항목

증가

뇨량, Glucose(혈액, 뇨), Triglyceride, Uric acid, Amylase, Insulin, Cholesterol, Lipoprotein, Catecholamine, Aldosterone, VMA, Vitamin 등

감소

HB, Hct, WBC, Total protein, Albumin, Iron 등

뇨

단회뇨(Random urine)

아침 첫뇨의 중간뇨를 받아 가능한 한 빠른시간 내에 의뢰해 주시고 수거 전까지 냉장보관하여 주십시오.

24시간 뇨(24 Hours urine)

아침 08 : 00시에 소변을 보게 하여 버린 후 다음날 아침 08:00시 소변까지 모두 24hrsU 채뇨봉투에 받습니다.(대변시의 소변도 포함)

*검사항목 중 대부분은 냉장보관으로도 가능하나, 반드시 보존제를 넣어야 하는 경우에 지정된 보존제 정도를 용기에 담아서 보내주십시오.(축뇨량을 반드시 기입요망)

체액

체액(Body fluid) 중 채취 후 응고되기 쉬운 Pleural, Ascitic, Joint fluid 등은 응고(CSF 제외)되면 Cell count 나 Chemistry 검사종목에 큰 오차가 생깁니다.